日韩伦理中文字幕在线观看-国产女主播大秀在线观看-超碰在线97免费视频-欧美一级日韩久久精品

液氮罐凍存細(xì)胞的方法和步驟

時(shí)間:2020-05-03 09:40來(lái)源: 作者:ydgmve2020yyx 點(diǎn)擊:
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一,使用凍存技能將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫生存,可以使細(xì)胞臨時(shí)離開(kāi)生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來(lái),如許在必要的時(shí)間再蘇醒細(xì)胞用于實(shí)行。
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一,使用凍存技能將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫生存,可以使細(xì)胞臨時(shí)離開(kāi)生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來(lái),如許在必要的時(shí)間再蘇醒細(xì)胞用于實(shí)行。并且適度地生存肯定量的細(xì)胞,可以防備因正在造就的細(xì)胞被污染或其他不測(cè)變亂而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。

除此之外,還可以使用細(xì)胞凍存的情勢(shì)來(lái)購(gòu)置、寄贈(zèng)、互換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向造就基中參加掩護(hù)劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)低落,加之在遲鈍凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,淘汰了冰晶形成,從而制止細(xì)胞毀傷。尺度冷凍速率開(kāi)始為-1 到 -2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加快,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

現(xiàn)在常用的掩護(hù)劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞。

使用材料

儀器:液氮罐、凍存管(塑料螺口專用凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機(jī)等

試劑:0.25%胰酶、造就基、含掩護(hù)劑的造就基(即凍存液)

附:凍存液配制:造就基參加甘油或DSMO,使其終濃度達(dá)5-20%。掩護(hù)劑的種類和用量視差別細(xì)胞而差別。配好后4℃下生存。

操作步聚

1.消化細(xì)胞,將細(xì)胞懸液網(wǎng)絡(luò)至離心管中。

2.1000rpm離心10分鐘,棄上清液。

3.沉淀加含掩護(hù)液的造就,計(jì)數(shù),調(diào)解至5106/ml左右。

4.將懸液分至凍存管中,每管1ml。

5.將凍存管口封嚴(yán)。如用安瓿瓶則火焰封口,封口肯定要嚴(yán),不然蘇醒時(shí)易出現(xiàn)爆裂。

6.貼上標(biāo)簽,寫(xiě)明細(xì)胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細(xì)繩。

7.按下列次序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時(shí))→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。

注意:操縱時(shí)應(yīng)警惕,以免液氮凍傷。液氮定期查抄,隨時(shí)增補(bǔ),絕對(duì)不克不及揮發(fā)潔凈,一樣通常30立升的液氮能用1~1.5月。液氮罐
  • 本文鏈接地址:http://xinnuotz.com/638.html
  • 液氮罐相關(guān)資訊

    收縮
    • 電話咨詢

    • 15611258074
    • 微信咨詢
    国产激情久久久久久久久久久| 日韩精品人成在线播放| 高清av网站大全网站| 日本精品在线不卡视频| 丰满少妇诱惑在线观看| 国产自拍最新在线视频| 国产精品国产三级国av中文 | 日韩av一区二区国产| 伊人久久九九精品综合| 国产精品一区巨乳人妻| 五月婷婷av综合激情| 亚洲欧美日韩老汉影院| 国产产品在线免费看91| 日韩精品亚洲一区二区三区免费| 国产欧美日韩在线高清| 国产91香蕉在线精品| 日韩成人在线视频观看| 久久久偷拍美女撒尿尿| 日本高清不卡中文字幕| 玩弄丰满熟妇班主任老师 | 日本午夜视频在线观看| 欧美成人精品视频在线不卡| 亚洲av天堂在线观看| 在线成人影院中文字幕| 黑丝美女大战白丝美女| 日本黄色录像黄色录像| 在线最新亚洲日本韩国| 免费又色又爽无遮挡网站| av手机天堂网免费观看| 欧美日韩亚洲高清专区| 亚洲国产欧美日韩久久| 视频一区视频二区三区| 亚洲av永久精品桃色| 精品国产91乱码一区二区三区| 日本一二三四卡久久精品| 国产精品久久久久久老熟女| 天堂在线av免费观看| 91久久亚洲综合精品日本| 刘亦菲毛片一区二区三区| 国产剧免费看视频网站成人| 亚洲一区麻豆文化传媒|